使用色谱柱前有哪些准备工作,做好这些让色谱柱发挥更加稳定[今日热点]-凯时kb88官方
使用色谱柱前有哪些准备工作?我们的实验室仪器在使用前都会有一些简单的调试工作,我们的色谱柱也不例外,千万不要小看了这些调试,如果不做这些调试工作很可能会导致实验时出现一些干扰因素,从而导致实验结果不准确,浪费实验资源,那么使用色谱柱前有哪些准备工作?下面就给大家详细介绍一下。
在使用色谱柱前我们可以做好以下一些事:
1、样品的前处理:
a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制:
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:
a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用uv检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择:
因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
以上就是在使用色谱柱前我们可以先做好的工作,这些都是常年做实验积累下来的经验,我们要掌握这些技巧,能让我们在做实验时事半功倍。如需继续了解色谱柱相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《影响色谱柱性能的因素有哪些,色谱柱厂家教你用好色谱柱[行业热点]》。
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