液相色谱仪操作要注意什么,看完你就知道了[最新更新]-凯时kb88官方
凯时kb88官方-凯时app官方首页操作要注意什么,液相色谱仪利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对复杂样品进行高效分离与分析。其操作不仅要求技术精湛,还需严格遵循操作规范,以确保实验结果的可靠性和仪器的稳定运行,今天天恒就带大家来了解液相色谱仪操作要注意什么。
一、流动相处理
流动相选择:流动相必须使用hplc级试剂,以确保其纯度和稳定性。使用前需过滤以去除颗粒性杂质和其他物质,常用0.45μm或更细的滤膜进行过滤。
脱气处理:过滤后的流动相需进行超声波脱气,以去除溶解在其中的气体,避免气泡对实验结果的影响。脱气后应恢复至室温再使用。
避免纯乙腈作为流动相:纯乙腈作为流动相易导致单向阀粘住,影响泵的正常工作,因此应避免使用。
二、色谱柱维护
使用前准备:使用色谱柱前,应仔细阅读其附带的说明书,了解适用范围、ph值范围等关键信息。对于含盐流动相,使用后应先用水或低浓度甲醇水冲洗,再用甲醇彻底冲洗,以延长色谱柱的使用寿命。
轻拿轻放:色谱柱为精密仪器,使用过程中应轻拿轻放,避免剧烈震动或碰撞。
保存条件:长时间不使用色谱柱时,应将其取下并用堵头封好保存。避免使用纯水保存,因为纯水易导致长霉,应选用有机相(如甲醇)进行保存。
三、仪器开机与关机
开机操作:开机前,应检查各组件电源连接是否正确,确保harb电源稳定。自上而下打开各组件电源,待bootpserver显示有信号后,再打开工作站进行后续操作。
冲洗系统:开机后,需用流动相冲洗系统一段时间,以确保系统稳定。对于含盐流动相,应先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相。
关机操作:实验结束后,应先关闭泵、检测器等组件,再关闭工作站和计算机。自下而上关闭色谱仪各组件电源,确保仪器安全关闭。
四、样品处理与进样
样品处理:样品应提前处理至适合液相色谱分析的状态,避免杂质对色谱柱和仪器的损害。对于易挥发性样品,应采取相应措施减少挥发。
进样操作:使用手动进样器进样时,进样前后均需用洗针液洗净进样针筒。洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒三遍以上,并排除针筒中的气泡。
避免污染:c18柱等特定色谱柱不能进蛋白样品、血样、生物样品等易污染物质,以免损坏色谱柱和影响实验结果。
五、清洗与保养
清洗管路:使用缓冲溶液后,应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,再用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,也需用去离子水冲洗。
定期检查:定期检查仪器各部件的连接情况,确保无漏液现象。若发现压力异常,应及时检查并排除故障。
记录与报告:使用者应认真履行仪器使用登记制度,记录每次实验的操作过程和结果。出现问题时,应及时向老师或专业人员报告,不得擅自拆卸仪器。
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液相色谱仪作为现代分析化学的重要工具,其操作涉及多个精密步骤和细节。通过遵循正确的操作流程和注意事项,可以有效提高实验结果的准确性和仪器的使用寿命。《实验室仪器中液相色谱仪色谱峰拖尾的原因是什么?一文带你了解【知识普及】》
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